Agar Thayer Martin

Medio enriquecido y selectivo para el aislamiento de Neisseria gonorrhoeae y Neisseria meningitidis a partir de muestras con flora acompañante (secreción uretral, endocervical, rectal y faríngea).

Fundamento

• Es un agar chocolate (base GC con hemoglobina y suplemento de enriquecimiento) al que se añade una mezcla de antimicrobianos.
• Vancomicina: inhibe a los grampositivos.
• Colistina: inhibe a los gramnegativos, incluidas las Neisseria saprófitas.
• Nistatina: inhibe a las levaduras.
• La fórmula modificada añade trimetoprim, que frena el crecimiento invasor de Proteus.

Lectura

Microorganismo	Colonias
Neisseria gonorrhoeae	Colonias pequeñas, grisáceas a blanquecinas, brillantes, convexas; oxidasa positiva
Neisseria meningitidis	Colonias medianas, grises, lisas, a veces mucoides; oxidasa positiva
Flora acompañante	Inhibida total o parcialmente

Características técnicas

Característica	Valor general
Tipo de medio	Enriquecido y selectivo
Formato	Placa de Petri lista para usar
Aspecto	Marrón chocolate, opaco, homogéneo
pH final (25 °C)	7,2 ± 0,2
Incubación	35 – 37 °C, con 3 a 7 % de CO₂ y humedad, 24 a 72 horas
Control de calidad sugerido	N. gonorrhoeae ATCC 43069 y N. meningitidis ATCC 13090 (crecimiento); Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, E. coli ATCC 25922 y Candida albicans ATCC 60193 (inhibición)

Valores generales de la formulación; los del lote se confirman en el certificado del fabricante.

Para uso diagnóstico in vitro por personal de laboratorio. Siga siempre el inserto del fabricante.

Almacenamiento

• Conservar refrigerado entre 2 y 8 °C, en su empaque original cerrado. No congelar: el hielo rompe el gel y la placa suelta agua al descongelarse.
• Guardar las placas invertidas (el agar arriba y la tapa abajo), para que el agua de condensación no caiga sobre la superficie.
• Proteger de la luz directa y del calor; no dejar junto a la pared del fondo de la nevera, donde puede congelarse.
• Evitar cambios bruscos de temperatura: producen condensación dentro de la placa.
• Usar primero el lote que vence primero y no usar después de la fecha de vencimiento.
• Los antimicrobianos pierden actividad con el calor y el tiempo: una placa vieja o mal conservada deja de ser selectiva.

Manipulación

• Sacar de la nevera solo las placas que se van a usar y dejarlas alcanzar la temperatura ambiente antes de sembrar (unos 15 a 30 minutos, dentro de su bolsa).
• Sembrar sobre una superficie seca. Si hay gotas de condensación, secar la placa entreabierta e invertida en la incubadora o en cabina durante unos minutos.
• Trabajar con técnica aséptica (mechero o cabina de seguridad), sin tocar el agar y con la placa abierta el menor tiempo posible.
• Rotular en la base de la placa, no en la tapa.
• Devolver a la nevera las placas no usadas dentro de su bolsa cerrada, para que no se deshidraten.
• Descartar las placas usadas como residuo biológico, previa esterilización según las normas del laboratorio.
• Neisseria gonorrhoeae muere con el frío y la desecación: sembrar la muestra de inmediato, sobre placas a temperatura ambiente, e incubar enseguida.
• Incubar en atmósfera húmeda con CO₂ y revisar a las 24, 48 y 72 horas antes de informar negativo.
• No refrigerar la muestra ni los hisopos antes de sembrar.

No usar la placa si

• Hay contaminación visible (colonias o película antes de sembrar).
• El agar está deshidratado: agrietado, adelgazado o despegado del borde de la placa.
• Hay cambio de color respecto al aspecto normal del medio, precipitados o exceso de agua.
• La placa está rota, el empaque llegó abierto o el lote está vencido.
• El medio se ve reseco u oscurecido, o perdió el color marrón uniforme.

Limitaciones

• Algunas cepas de N. gonorrhoeae son sensibles a la vancomicina: en muestras de sitios estériles sembrar también agar chocolate no selectivo.
• Pueden crecer algunas cepas de Neisseria lactamica, Capnocytophaga y otras resistentes a los inhibidores.
• Toda colonia sospechosa se confirma con Gram (diplococos gramnegativos), oxidasa y pruebas de identificación.

Referencias

• Thayer JD, Martin JE Jr. Improved medium selective for cultivation of N. gonorrhoeae and N. meningitidis. Public Health Reports. 1966;81(6):559-562.
• Procop GW, Church DL, Hall GS, et al. Koneman's Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology. 7.ª ed. Wolters Kluwer; 2017.
• Tille PM. Bailey & Scott's Diagnostic Microbiology. 15.ª ed. Elsevier; 2022.
• Zimbro MJ, Power DA, Miller SM, Wilson GE, Johnson JA, eds. Difco & BBL Manual: Manual of Microbiological Culture Media. 2.ª ed. BD; 2009.
• Clinical and Laboratory Standards Institute. Quality Control for Commercially Prepared Microbiological Culture Media. Documento M22-A3. CLSI; 2004.

Contenido de referencia para profesionales del laboratorio de microbiología. Los datos propios del producto (lote, vencimiento, pH, control de calidad) se confirman en el inserto y el certificado del fabricante.