Agar Sangre

Medio enriquecido, no selectivo y diferencial para el aislamiento de la mayoría de bacterias de importancia clínica, incluidas las exigentes, y para observar las reacciones de hemólisis, a partir de casi cualquier tipo de muestra.

Fundamento

• Una base nutritiva (tripticasa de soya o Columbia) se suplementa con 5 % de sangre de cordero desfibrinada.
• La sangre aporta factores de crecimiento y permite ver la acción de las hemolisinas bacterianas sobre los glóbulos rojos.
• La sangre de cordero favorece la lectura de la hemólisis de los estreptococos e inhibe a Haemophilus haemolyticus, que podría confundirse con ellos.

Lectura de la hemólisis

Tipo	Aspecto alrededor de la colonia	Ejemplos
Beta (β)	Halo transparente: lisis completa	Streptococcus pyogenes, S. agalactiae, Staphylococcus aureus
Alfa (α)	Halo verdoso: lisis parcial	Streptococcus pneumoniae, estreptococos del grupo viridans
Gamma (γ)	Sin cambio: no hay hemólisis	Enterococcus (la mayoría), Staphylococcus epidermidis

Características técnicas

Característica	Valor general
Tipo de medio	Enriquecido, no selectivo, diferencial (hemólisis)
Formato	Placa de Petri lista para usar
Aspecto	Rojo cereza, opaco, homogéneo
pH final (25 °C)	7,3 ± 0,2
Incubación	35 – 37 °C, en aerobiosis o con 5 % de CO₂, 18 a 48 horas
Control de calidad sugerido	Streptococcus pyogenes ATCC 19615 (beta); S. pneumoniae ATCC 6305 (alfa); Staphylococcus aureus ATCC 25923 y E. coli ATCC 25922 (crecimiento)

Valores generales de la formulación; los del lote se confirman en el certificado del fabricante.

Para uso diagnóstico in vitro por personal de laboratorio. Siga siempre el inserto del fabricante.

Almacenamiento

• Conservar refrigerado entre 2 y 8 °C, en su empaque original cerrado. No congelar: el hielo rompe el gel y la placa suelta agua al descongelarse.
• Guardar las placas invertidas (el agar arriba y la tapa abajo), para que el agua de condensación no caiga sobre la superficie.
• Proteger de la luz directa y del calor; no dejar junto a la pared del fondo de la nevera, donde puede congelarse.
• Evitar cambios bruscos de temperatura: producen condensación dentro de la placa.
• Usar primero el lote que vence primero y no usar después de la fecha de vencimiento.
• La sangre es el componente más delicado: el calor y la congelación rompen los glóbulos rojos y el medio queda inservible.

Manipulación

• Sacar de la nevera solo las placas que se van a usar y dejarlas alcanzar la temperatura ambiente antes de sembrar (unos 15 a 30 minutos, dentro de su bolsa).
• Sembrar sobre una superficie seca. Si hay gotas de condensación, secar la placa entreabierta e invertida en la incubadora o en cabina durante unos minutos.
• Trabajar con técnica aséptica (mechero o cabina de seguridad), sin tocar el agar y con la placa abierta el menor tiempo posible.
• Rotular en la base de la placa, no en la tapa.
• Devolver a la nevera las placas no usadas dentro de su bolsa cerrada, para que no se deshidraten.
• Descartar las placas usadas como residuo biológico, previa esterilización según las normas del laboratorio.
• Para ver mejor la beta hemólisis, hacer punciones en el agar con el asa al sembrar (la estreptolisina O actúa mejor sin oxígeno).
• Leer la hemólisis a contraluz.

No usar la placa si

• Hay contaminación visible (colonias o película antes de sembrar).
• El agar está deshidratado: agrietado, adelgazado o despegado del borde de la placa.
• Hay cambio de color respecto al aspecto normal del medio, precipitados o exceso de agua.
• La placa está rota, el empaque llegó abierto o el lote está vencido.
• El medio se ve marrón, oscuro o translúcido (sangre hemolizada) en lugar de rojo cereza.

Limitaciones

• Haemophilus influenzae no crece bien, salvo en satelitismo: usar agar chocolate.
• El tipo de hemólisis depende de la especie de la sangre, la base del medio y la atmósfera de incubación.
• No es selectivo: la flora acompañante puede dificultar el aislamiento.

Referencias

• Procop GW, Church DL, Hall GS, et al. Koneman's Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology. 7.ª ed. Wolters Kluwer; 2017.
• Tille PM. Bailey & Scott's Diagnostic Microbiology. 15.ª ed. Elsevier; 2022.
• Zimbro MJ, Power DA, Miller SM, Wilson GE, Johnson JA, eds. Difco & BBL Manual: Manual of Microbiological Culture Media. 2.ª ed. BD; 2009.
• Clinical and Laboratory Standards Institute. Quality Control for Commercially Prepared Microbiological Culture Media. Documento M22-A3. CLSI; 2004.

Contenido de referencia para profesionales del laboratorio de microbiología. Los datos propios del producto (lote, vencimiento, pH, control de calidad) se confirman en el inserto y el certificado del fabricante.