Agar MacConkey Sorbitol

Medio selectivo y diferencial para el tamizaje de Escherichia coli O157:H7 (productora de toxina Shiga) en heces, sobre todo en diarrea con sangre, y en alimentos.

Fundamento

• Es un agar MacConkey en el que la lactosa se reemplaza por D-sorbitol.
• La mayoría de las cepas de E. coli fermentan el sorbitol en 24 horas (colonias rosadas); E. coli O157:H7 no lo fermenta y forma colonias incoloras.
• Las sales biliares y el cristal violeta inhiben a los grampositivos; el rojo neutro es el indicador de pH.

Lectura

Microorganismo	Colonias
E. coli O157:H7	Incoloras o transparentes (sorbitol negativo)
Otras E. coli y coliformes	Rosadas a rojas (sorbitol positivo)
Proteus, Morganella, algunas Hafnia	Incoloras: se diferencian con pruebas adicionales
Grampositivos	Inhibidos

Características técnicas

Característica	Valor general
Tipo de medio	Selectivo y diferencial
Formato	Placa de Petri lista para usar
Aspecto	Rojo rosado a rojo púrpura, transparente
pH final (25 °C)	7,1 ± 0,2
Incubación	35 – 37 °C, en aerobiosis, 18 a 24 horas
Control de calidad sugerido	E. coli O157:H7 ATCC 35150 o ATCC 43888 (incolora); E. coli ATCC 25922 (rosada); Enterococcus faecalis ATCC 29212 (inhibido)

Valores generales de la formulación; los del lote se confirman en el certificado del fabricante.

Para uso diagnóstico in vitro por personal de laboratorio. Siga siempre el inserto del fabricante.

Almacenamiento

• Conservar refrigerado entre 2 y 8 °C, en su empaque original cerrado. No congelar: el hielo rompe el gel y la placa suelta agua al descongelarse.
• Guardar las placas invertidas (el agar arriba y la tapa abajo), para que el agua de condensación no caiga sobre la superficie.
• Proteger de la luz directa y del calor; no dejar junto a la pared del fondo de la nevera, donde puede congelarse.
• Evitar cambios bruscos de temperatura: producen condensación dentro de la placa.
• Usar primero el lote que vence primero y no usar después de la fecha de vencimiento.
• El rojo neutro es sensible a la luz: mantener las placas en su empaque.

Manipulación

• Sacar de la nevera solo las placas que se van a usar y dejarlas alcanzar la temperatura ambiente antes de sembrar (unos 15 a 30 minutos, dentro de su bolsa).
• Sembrar sobre una superficie seca. Si hay gotas de condensación, secar la placa entreabierta e invertida en la incubadora o en cabina durante unos minutos.
• Trabajar con técnica aséptica (mechero o cabina de seguridad), sin tocar el agar y con la placa abierta el menor tiempo posible.
• Rotular en la base de la placa, no en la tapa.
• Devolver a la nevera las placas no usadas dentro de su bolsa cerrada, para que no se deshidraten.
• Descartar las placas usadas como residuo biológico, previa esterilización según las normas del laboratorio.
• Leer entre 18 y 24 horas: con incubación prolongada O157:H7 puede empezar a fermentar el sorbitol y los colores dejan de ser confiables.
• Incubar en aerobiosis, sin CO₂.
• Las colonias sospechosas son de riesgo biológico alto (dosis infectante muy baja): manipular en cabina de seguridad.

No usar la placa si

• Hay contaminación visible (colonias o película antes de sembrar).
• El agar está deshidratado: agrietado, adelgazado o despegado del borde de la placa.
• Hay cambio de color respecto al aspecto normal del medio, precipitados o exceso de agua.
• La placa está rota, el empaque llegó abierto o el lote está vencido.
• El medio se ve amarillento, decolorado o con precipitado.

Limitaciones

• Es una prueba de tamizaje: toda colonia incolora se confirma como E. coli y con antisuero o látex O157, y la toxina Shiga por inmunoensayo o PCR.
• No detecta las E. coli productoras de toxina Shiga que no son O157 ni las O157 fermentadoras de sorbitol.

Referencias

• March SB, Ratnam S. Sorbitol-MacConkey medium for detection of Escherichia coli O157:H7 associated with hemorrhagic colitis. Journal of Clinical Microbiology. 1986;23(5):869-872.
• Procop GW, Church DL, Hall GS, et al. Koneman's Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology. 7.ª ed. Wolters Kluwer; 2017.
• Tille PM. Bailey & Scott's Diagnostic Microbiology. 15.ª ed. Elsevier; 2022.
• Zimbro MJ, Power DA, Miller SM, Wilson GE, Johnson JA, eds. Difco & BBL Manual: Manual of Microbiological Culture Media. 2.ª ed. BD; 2009.
• Clinical and Laboratory Standards Institute. Quality Control for Commercially Prepared Microbiological Culture Media. Documento M22-A3. CLSI; 2004.

Contenido de referencia para profesionales del laboratorio de microbiología. Los datos propios del producto (lote, vencimiento, pH, control de calidad) se confirman en el inserto y el certificado del fabricante.