Agar Hektoen Entérico

Medio moderadamente selectivo y diferencial para el aislamiento de enteropatógenos, en especial Salmonella y Shigella, a partir de heces, alimentos y otras muestras con flora entérica abundante.

Fundamento

• Las sales biliares inhiben a los grampositivos y frenan parte de la flora entérica normal.
• Tres azúcares (lactosa, sacarosa y salicina) y los indicadores azul de bromotimol y fucsina ácida diferencian a los fermentadores (colonias amarillo-naranja a salmón) de los no fermentadores (colonias verdes o verde azuladas).
• El tiosulfato de sodio y el citrato férrico amónico revelan la producción de H₂S: colonias con centro negro.
• Su mayor contenido de peptonas y carbohidratos compensa el efecto inhibidor de las sales biliares, lo que mejora la recuperación de Shigella.

Lectura

Microorganismo	Colonias
Salmonella	Verde azuladas, casi siempre con centro negro (H₂S)
Shigella	Verdes o verde azuladas, húmedas, sin centro negro
Escherichia coli y otros coliformes	Amarillo-naranja a salmón; pueden precipitar la bilis alrededor
Proteus	Variables; pueden tener centro negro (confirmar siempre)
Grampositivos	Inhibidos

Características técnicas

Característica	Valor general
Tipo de medio	Selectivo y diferencial
Formato	Placa de Petri lista para usar
Aspecto	Verde, transparente a ligeramente opalescente
pH final (25 °C)	7,5 ± 0,2
Incubación	35 – 37 °C, en aerobiosis, 18 a 24 horas (hasta 48)
Control de calidad sugerido	Salmonella Typhimurium ATCC 14028 (verde azulada, centro negro); Shigella flexneri ATCC 12022 (verde); E. coli ATCC 25922 (salmón, parcialmente inhibida); Enterococcus faecalis ATCC 29212 (inhibido)

Valores generales de la formulación; los del lote se confirman en el certificado del fabricante.

Para uso diagnóstico in vitro por personal de laboratorio. Siga siempre el inserto del fabricante.

Almacenamiento

• Conservar refrigerado entre 2 y 8 °C, en su empaque original cerrado. No congelar: el hielo rompe el gel y la placa suelta agua al descongelarse.
• Guardar las placas invertidas (el agar arriba y la tapa abajo), para que el agua de condensación no caiga sobre la superficie.
• Proteger de la luz directa y del calor; no dejar junto a la pared del fondo de la nevera, donde puede congelarse.
• Evitar cambios bruscos de temperatura: producen condensación dentro de la placa.
• Usar primero el lote que vence primero y no usar después de la fecha de vencimiento.
• Los indicadores son sensibles a la luz: mantener las placas en su empaque y en la oscuridad.

Manipulación

• Sacar de la nevera solo las placas que se van a usar y dejarlas alcanzar la temperatura ambiente antes de sembrar (unos 15 a 30 minutos, dentro de su bolsa).
• Sembrar sobre una superficie seca. Si hay gotas de condensación, secar la placa entreabierta e invertida en la incubadora o en cabina durante unos minutos.
• Trabajar con técnica aséptica (mechero o cabina de seguridad), sin tocar el agar y con la placa abierta el menor tiempo posible.
• Rotular en la base de la placa, no en la tapa.
• Devolver a la nevera las placas no usadas dentro de su bolsa cerrada, para que no se deshidraten.
• Descartar las placas usadas como residuo biológico, previa esterilización según las normas del laboratorio.
• Sembrar por agotamiento para obtener colonias aisladas: el color se interpreta colonia por colonia.
• Para mejorar la recuperación, sembrar también desde un caldo de enriquecimiento (selenito o tetrationato).

No usar la placa si

• Hay contaminación visible (colonias o película antes de sembrar).
• El agar está deshidratado: agrietado, adelgazado o despegado del borde de la placa.
• Hay cambio de color respecto al aspecto normal del medio, precipitados o exceso de agua.
• La placa está rota, el empaque llegó abierto o el lote está vencido.
• El medio perdió su color verde (se ve amarillento, azul intenso o marrón).

Limitaciones

• Algunas cepas de Salmonella no producen H₂S y algunas Shigella crecen poco: usar en paralelo otro medio (MacConkey, XLD o SS).
• Proteus y otros no fermentadores pueden parecerse a Salmonella.
• Toda colonia sospechosa se confirma con pruebas bioquímicas y serología.

Referencias

• King S, Metzger WI. A new plating medium for the isolation of enteric pathogens. I. Hektoen enteric agar. Applied Microbiology. 1968;16(4):577-578.
• Procop GW, Church DL, Hall GS, et al. Koneman's Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology. 7.ª ed. Wolters Kluwer; 2017.
• Tille PM. Bailey & Scott's Diagnostic Microbiology. 15.ª ed. Elsevier; 2022.
• Zimbro MJ, Power DA, Miller SM, Wilson GE, Johnson JA, eds. Difco & BBL Manual: Manual of Microbiological Culture Media. 2.ª ed. BD; 2009.
• Clinical and Laboratory Standards Institute. Quality Control for Commercially Prepared Microbiological Culture Media. Documento M22-A3. CLSI; 2004.

Contenido de referencia para profesionales del laboratorio de microbiología. Los datos propios del producto (lote, vencimiento, pH, control de calidad) se confirman en el inserto y el certificado del fabricante.